(1)靈芝培養基的制備與菌種的分離

①母種培養基配方及制備

母種培養基 多采用馬鈴薯一瓊脂(PDA)培養基，其配方：馬鈴薯(去皮)200克，葡萄糖20克，瓊脂20克，磷酸二氫鉀3克，硫酸鎂1.5克，維生素B11～2片，水l000毫升。

制備方法 按常規方法進行。培養基制成后，調節pH值4～6，分裝試管，高壓滅菌30分鐘，稍冷卻后擺成斜面培養基。

②靈芝純菌種的分離 常用有組織分離法和孢子分離法兩種。

組織分離法 在無菌的條件下，選取新鮮、成熟的靈芝，于菌蓋或菌柄內部切取一小塊黃豆大小的組織塊，接種在斜面培養基上。置溫度24～26℃下培養7～10天;當白色菌絲布滿斜面時，即得母種，然后再擴大培養成原種和栽培種。

孢子分離法 在無菌的條件下，取新鮮成熟的靈芝菌，于馬鈴薯培養基上培養一段時間，溫度控制在24～26℃左右，培養基表面上便形成與子實體(小靈芝)相似物，在貼近管壁處形成菌管，自菌管管口中散發出孢子粉，便是純孢子粉，將此孢子粉接種到培養基上獲得一層薄薄的菌苔狀的營養菌絲，即得靈芝純菌種。

(2)人工栽培方法 目前多采用瓶栽和段木培養兩種方法。

①靈芝瓶栽法

培養料配方 棉子殼80%，麩皮16%，蔗糖1%，生石膏3%。加水適量，混拌均勻，使培養料含水量在60%～70%左右，以手握之不出水為度，調節pH值5～6。

裝瓶滅菌 料拌均勻后，先悶l小時，然后裝入廣口瓶中，裝料要上緊下松，裝量距瓶口3～5厘米即可。裝好后用尖圓木棒打一通氣孔，擦凈瓶體，用塑料薄膜加牛皮紙扎緊瓶口，然后進行滅菌(高壓滅菌，壓力1.1千克/每平方厘米，時間1.5小時;常壓滅菌100℃，保持8～10小時，再悶12小時)。

接種 在無菌室內進行。用75%的酒精消毒接種工具，然后用右手拿接種耙在酒精燈火焰上滅菌，左手拿菌種瓶，并打開菌種瓶口，在火焰旁用接種耙取出一塊小棗大小的菌種，迅速放人栽培料瓶中，經火焰燒口，用牛皮紙包扎好，置于培養室內培養。

培養與管理 在溫度20～26℃，空氣相對濕度在60%以下，約培養20～30天，菌絲即可長滿全瓶;再繼續培養，培養料上就會長出l厘米大小的白色疙瘩或突起物，即為子實體原基??芝蕾。當芝蕾長到接近瓶塞時，拔掉瓶口棉塞，讓其向瓶外生長，這時，控制室溫在26～28℃，空氣相對濕度在90%～95%，保持空氣新鮮，給以散射光等條件，突起物芝蕾向上伸長成菌柄，菌柄上再長出菌蓋，孢子可從菌蓋中散發出來。從接種到長出菌蓋，約需2個月時間。生長期要注意管理，每天要通過定時開窗的辦法換氣，如在氣溫偏高時，上、下午都要開窗。

②靈芝段木培養法

段木的選擇 應選用櫟、栗、柞、桃、柳、楊、刺槐等闊葉樹作段木。直徑5～15厘米均可選用。鋸成l米長的段木，不要削皮，碼堆干燥。

接種 選擇培養20天左右子實體原基剛形成的新鮮菌種。這種菌種生命力強，接入段木后發育快，且不怕雜菌污染。接種工具可用直徑1～1.2厘米的打孔器或電鉆頭。打入段約l厘米深，行株距20厘米×20厘米，呈品字形排列。打孔后立即接種。接種前先將菌種取出，截成l平方厘米的水塊，輕輕塞入孔穴中，稍壓緊后蓋上樹皮。30天后，菌絲便浸入段木，并可見孔穴四周形成棕色菌圈，說明接種成功。立即將段木埋入pH值5～6的酸性土壤中，若天氣干旱，可淋水濕潤土壤。遇雨季或雨天，要注意排水。此外，還要在栽培場周圍撒一圈拌有滅蟻靈的毒土，誘殺白蟻，防止危害段木。第二年清明節后，當氣溫升至25℃左右，可取出數根段木檢查：揭開樹皮蓋，見孔穴周圍已長成茶褐色，或已長出芝蕾;段木兩端有白色菌絲或淺褐色菌膜，并可嗅到靈芝菌絲的特殊氣味，顯示菌絲已成熟。立即將段木挖出，截成長17～22厘米的小段木，然后，將其斜埋入酸性含砂礫的土壤中，上端露出地面約3厘米，且覆蓋雜草遮蔭，隔數日灑一次水，保持土壤濕潤，經7～l0天開始長出芝蕾。在生長芝蕾期，栽培場要保持90%的相對濕度，約2個月左右芝蕾長成靈芝成品，即可采收。