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葉酸和(或)維生素B12缺乏均可引起巨幼細胞貧血，并且巨幼細胞性貧血中多數為葉酸缺乏，以妊娠期女性和嬰幼兒多見，原因是體內不能合成葉酸，所需葉酸只能從食物中供給。而富含葉酸的食物見于新鮮蔬菜、水果、酵母、動物肝腎等，由于葉酸性質極不穩定，光照及煮沸就會破壞，因此，食品加工不當就會導致葉酸含量降低。此外，生長期嬰幼兒、妊娠期女性、甲狀腺功能亢進、惡性腫瘤、白血病、溶血性貧血感染等對葉酸需求量增加，因此，以上這些疾病患者容易伴發葉酸缺乏的巨幼細胞性貧血。葉酸是細胞核DNA合成過程中的重要輔酶，葉酸缺乏導致細胞核和細胞漿的發育不同步，引起細胞巨幼樣變，細胞在骨髓內被破壞，無效造血，外周血可見巨幼細胞性貧血，即平均紅細胞量、平均紅細胞血紅蛋白量、平均紅細胞的血紅蛋白濃度增高。葉酸缺乏可以引起巨幼細胞貧血，葉酸缺乏的高危人群可以補充葉酸片劑進行預防。