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臨床一般需經三次嚴格精液檢查，通過把精液高速離心后，在沉渣中仍無精子，而且需排除男性不射精癥或逆行射精情況，才會確診為真正的無精子癥。確定無精子癥后，首先患者需進行詳細體格檢查，初步判斷大概病因；隨后對患者進行抽血檢查，主要包括性激素五項、染色體以及Y染色體微缺失等項目；最后進行B超或磁共振檢查，了解局部器官病變情況，幫助醫生判斷病情。