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通常皮質醇的檢查需要采取靜脈抽血的方式完成，但具體抽血時間要取決于醫生做檢查的目的。如果臨床懷疑患者有皮質醇增多現象，需查3個時間點皮質醇節律，分別是早上8點、下午4點以及晚上12點，即凌晨0點。正常人早上8點皮質醇最高，下午4點會降至早上一半，通常0點會降到早上8點的1/3-1/4。皮質醇增多癥患者可出現皮質醇節律紊亂，可能0點與8點一樣高甚至比8點更高。若考慮患者屬于皮質功能減退，通常只需要早上8點抽血檢查即可。此外，患者在抽血時，還要排除患者處于應激狀態，如患者正在發燒、存在較為嚴重的感染或者情緒焦慮、緊張、抑郁等，均可能導致皮質醇分泌增加，不一定能夠反映患者真實水平。