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在發生感染到被發現前病原無法被檢測到的期間稱為窗口期，對于梅毒則不討論窗口期。 當感染梅毒時，機體可對梅毒螺旋體產生免疫反應，并且在相應的入侵部位出現癥狀，從感染到出現癥狀需要2-4周。同時，人體的免疫系統開始工作，產生一系列針對梅毒螺旋體的特異性抗體。抗體產生并且累積到能夠被檢測出的數量需要一段時間，檢測試驗包括梅毒螺旋體血清學試驗如TPPA、FTA-ABS，以上試驗結果由陰性變成陽性最快需要4周；而對于非梅毒螺旋體抗原血清學試驗，如RPR、TRUST，試驗結果由陰性變成陽性需6周左右。 根據最新版的診療指南和國家的行業標準，在高危接觸的4周以后，需要進行梅毒的血清學檢查。如果試驗結果是陰性，建議在之后的1個月內再進行一次檢查。如果檢查結果仍然是陰性，則基本可以排除梅毒感染。