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肉毒素注射后作用在神經肌肉接頭，使神經傳導不能啟動肌肉收縮，達到去除皺紋的目的。通常在注射后的2-3天即可出現作用，一周后作用比較完善，第一次注射能維持半年左右的時間，隨著耐藥性的發生，再次注射有效時間會縮短，大概維持3-4個月。 肉毒素起效時間與注射肉毒素的劑量不呈正比關系，過量注射肉毒素會導致表情過于死板。此外，藥液擴散到控制范圍之外會產生其他副作用，如注射抬頭紋、眉間紋時，由于藥液過度擴散易引起睜眼困難、提上眼肌麻痹等。