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肛門指檢如果采取正確方法，通常不會感覺特別疼痛，如果肛門較松弛，通常亦不會有特別的疼痛感。肛門指檢痛可能是由于肛門本身有疾病，比如肛門有狹窄、肛裂時，可能檢查時會有疼痛，亦可由緊張引起。患者在較緊張時，會較用力收縮肛門，收縮肛門時指檢，指頭通過肛門時會有阻力，從而會出現疼痛感。所以正常情況下，放松肛門，且肛門無狹窄等疾病，尤其無肛裂，肛門指檢并不會有疼痛感。通常需先用手指頭涂抹上潤滑油。隨后在肛門周圍反復按摩，讓患者放松，待肛門松弛時采用正確的方法做肛門指檢。